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发酵罐使用的时候怎么确定菌体生长状况

发布时间:2018-4-19 8:36:59 来源: 浏览次数:
摘要:发酵罐为研究小型发酵罐分批培养过程中大肠杆菌的菌体生长状况,本实验以分批培养法培养大肠杆菌,通过控制发酵过程的温度、溶氧、搅拌速度

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 发酵罐为研究小型发酵罐分批培养过程中大肠杆菌的菌体生长状况,本实验以分批培养法培养大肠杆菌,通过控制发酵过程的温度、溶氧、搅拌速度、空气流量、泡沫水平等参数,并每小时取样测DO值和还原糖量,制作菌体生长曲线,以此判断大肠杆菌的生长发酵状况。本实验选用生长迅速的大肠杆菌进行发酵罐的培养,同时定时地取样测定,包括对菌体进行镜检、测定不同时期发酵液的细菌浊度以及残留还原糖的变化发酵过程中,微生物的生长呈一定规律,掌握微生物生长曲线,可以防止菌种老化衰退、防止有害产物积累、提高发酵的效率,对生产有指导意义。通过测定生化指标,可大体了解菌体生长曲线,并在此基础上采取适当措施促进微生物生长。生长曲线中,微生物产生代谢产物或抗生素多在对数期末期或稳定期,因此可采取方法延长次期,如通过发酵罐等方法,不断调节培养基的pH值,去除有害物质,增加适量的气体和营养物质,使微生物延迟进入或不进入衰退期,从而生产出大量的有用的代谢产物。发酵罐是生化、食品、医药、农药、化工等生产领域的常用设备,虽然发酵罐的类型很多,如自吸式、气升式等。但发酵工厂用得最多的还是传统的通用发酵罐(机械搅拌发酵罐)[2]。发酵罐配备控制系统,它主要是对发酵过程中的各种参数如温度、pH、溶解氧、搅拌速度、空气流量、补料、泡沫水平等进行设定、显示、记录以及对这些参数进行反馈调节控制配制培养基 1) 配制种子固体培养基100mL,分装试管,0.1MPa灭菌20min,然后摆成斜面。 2) 配制种子培养液600mL,分装50mL于一个250mL三角瓶中(作一级种子瓶),余下550mL平均分装于三个500mL三角瓶中(作二级种子用),同上灭菌。 1.2.2接种与培养 

1) 上罐前两天,从冰箱中取出菌种转接斜面,37℃培养24h。 2) 上罐前一天,由斜面菌种转接一级种子瓶, 37℃振荡培养12h,然后转接二级种子瓶, 37℃振荡培养10h。 1.3上罐前的准备及实罐灭菌 1) 洗净发酵罐及各联接胶管 2) 配制发酵培养基5.0L,置发酵罐内,加入几滴泡敌。  3) 校正pH电极和溶氧(DO)电极。  ) 把电极插口、取样管、补料口、消泡剂料瓶等固定、密封好后,开夹套出、进水阀V2、W1,发酵罐使夹套充满水,用保护罩盖住罐盖及发酵罐,用倾倒螺钉锁紧法兰,开保护罩顶部排气阀V4,启动蒸气发生器,启动搅拌马达,调转速300r/min,开启冷凝水出水阀V1,开启蒸气阀门S1,进行在位灭菌。  5) 当保护罩顶部阀门V4有蒸气排出时,2min后关闭阀门,当罐温接近灭菌温度时,微开阀V4适当排气,并调整蒸气阀S1维持罐温。保温结束后,关蒸气阀S1,全开冷凝水出水阀V1,开进水阀W3,发酵罐将温度设定在37℃,切入自动。 6) 当温度降到100℃以下,缓缓开排气阀V4,使保护罩顶压力表指示为零,移去保护罩。  7) 连接通气管路,将进气过滤器K7口与控制台左侧空气出口连通,开弹簧夹,接通空气压缩机电源,对发酵罐进行通气,调整空气流量3~5L/min。  8) 当温度达到37℃时,将预先灭菌的pH电极、DO电极(75%酒精消毒、UV消毒)接入发酵罐,连接各电极导线。

发酵罐的雏形是在什么时候开始的在下一篇继续做详细介绍,如需了解更多,请持续关注。
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